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抗體定制

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4-1 多克隆抗體制備服務(wù)流程

動物免疫(宿主動物可提供兔、羊、雞、小鼠)
設(shè)計實(shí)驗(yàn)方案 客戶有特殊要求,需提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)要求 2-3工作日
免疫實(shí)驗(yàn)動物 分三到四次免疫,Elisa檢測即時效價 6-12周
微測Elisa檢測 以免疫原為抗原樣品,保證Elisa檢測效價1:10000以上 1周
客戶檢測 自行設(shè)計檢測方案 1周
合格,抗體及技術(shù)服務(wù)報告交付客戶;不合格服務(wù)停止

4-2單克隆抗體制備服務(wù)流程

第一階段:免疫小鼠
設(shè)計實(shí)驗(yàn)方案
客戶有特殊要求,需提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)要求
2個工作日
免疫實(shí)驗(yàn)動物
5只6-8周齡BALB/C小鼠,Elisa檢測即時效價
7-8周
Elisa檢測
以免疫原為抗原樣品,保證Elisa檢測效價1:10000以內(nèi)
1周
第二階段:單克隆雜交瘤細(xì)胞株的建立
細(xì)胞融合
取小鼠的脾細(xì)胞與骨髓細(xì)胞融合,篩選陽性克隆
 
克隆擴(kuò)增和初選
擴(kuò)增并低溫保存一個成功融合的產(chǎn)物
 
亞克隆
有限稀釋法亞克隆至行成穩(wěn)定的單克隆融合細(xì)胞株
 
抗體鑒定(依據(jù)訂單要求)
測定上清抗體亞型、特異性、抗體中和反應(yīng)性及抗體配對參數(shù)
 
腹水制備/轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)
根據(jù)客戶要求,提供不同種類服務(wù)
 
抗體純化
利用Protein A親和純化
 
第三階段:單克隆雜交瘤細(xì)胞株的驗(yàn)收
提供的雜交瘤培養(yǎng)物的腹水(或上清液)與顧客方提供的抗原樣品有特異性結(jié)核,同時抗抗體抗異性只針對客戶放提供的抗原樣品做出保證
第四階段:單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株的交付
2-3株雜交瘤細(xì)胞株和少量腹水(或上清液),需要純化的訂單會依據(jù)訂單要求提供純化后抗體,并給出相應(yīng)的鑒定報告(包括單抗的亞型)

4-3 抗體純化服務(wù)流程
抗原親和純化
使用抗原偶聯(lián)Sepharose 4B制備抗原親和純化層析柱,僅捕獲針對抗原的特異性抗體,純化得到的抗體產(chǎn)物純度高到90%以上,特異性強(qiáng)、靈敏度高,能明顯減低背景信噪干擾,是抗體純化中最佳的實(shí)驗(yàn)方法之一
1-2周
Protein A/G純化
特異性的捕獲樣品中國的IgG,性價比較高,特別適用于大規(guī)模樣品的純化
1-2周
飽和硫酸銨沉淀法純化
分離所有的免疫球蛋白,得率最高,但特異性和靈敏度偏低,僅適用于定性分析
1周
 

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