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      抗體定制

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      4-1 多克隆抗體制備服務(wù)流程

      動(dòng)物免疫(宿主動(dòng)物可提供兔、羊、雞、小鼠)
      設計實(shí)驗方案 客戶(hù)有特殊要求,需提供詳細的實(shí)驗要求 2-3工作日
      免疫實(shí)驗動(dòng)物 分三到四次免疫,Elisa檢測即時(shí)效價(jià) 6-12周
      微測Elisa檢測 以免疫原為抗原樣品,保證Elisa檢測效價(jià)1:10000以上 1周
      客戶(hù)檢測 自行設計檢測方案 1周
      合格,抗體及技術(shù)服務(wù)報告交付客戶(hù);不合格服務(wù)停止

      4-2單克隆抗體制備服務(wù)流程

      第一階段:免疫小鼠
      設計實(shí)驗方案
      客戶(hù)有特殊要求,需提供詳細的實(shí)驗要求
      2個(gè)工作日
      免疫實(shí)驗動(dòng)物
      5只6-8周齡BALB/C小鼠,Elisa檢測即時(shí)效價(jià)
      7-8周
      Elisa檢測
      以免疫原為抗原樣品,保證Elisa檢測效價(jià)1:10000以?xún)?/div>
      1周
      第二階段:?jiǎn)慰寺‰s交瘤細胞株的建立
      細胞融合
      取小鼠的脾細胞與骨髓細胞融合,篩選陽(yáng)性克隆
       
      克隆擴增和初選
      擴增并低溫保存一個(gè)成功融合的產(chǎn)物
       
      亞克隆
      有限稀釋法亞克隆至行成穩定的單克隆融合細胞株
       
      抗體鑒定(依據訂單要求)
      測定上清抗體亞型、特異性、抗體中和反應性及抗體配對參數
       
      腹水制備/轉瓶培養
      根據客戶(hù)要求,提供不同種類(lèi)服務(wù)
       
      抗體純化
      利用Protein A親和純化
       
      第三階段:?jiǎn)慰寺‰s交瘤細胞株的驗收
      提供的雜交瘤培養物的腹水(或上清液)與顧客方提供的抗原樣品有特異性結核,同時(shí)抗抗體抗異性只針對客戶(hù)放提供的抗原樣品做出保證
      第四階段:?jiǎn)慰寺】贵w雜交瘤細胞株的交付
      2-3株雜交瘤細胞株和少量腹水(或上清液),需要純化的訂單會(huì )依據訂單要求提供純化后抗體,并給出相應的鑒定報告(包括單抗的亞型)

      4-3 抗體純化服務(wù)流程
      抗原親和純化
      使用抗原偶聯(lián)Sepharose 4B制備抗原親和純化層析柱,僅捕獲針對抗原的特異性抗體,純化得到的抗體產(chǎn)物純度高到90%以上,特異性強、靈敏度高,能明顯減低背景信噪干擾,是抗體純化中最佳的實(shí)驗方法之一
      1-2周
      Protein A/G純化
      特異性的捕獲樣品中國的IgG,性?xún)r(jià)比較高,特別適用于大規模樣品的純化
      1-2周
      飽和硫酸銨沉淀法純化
      分離所有的免疫球蛋白,得率最高,但特異性和靈敏度偏低,僅適用于定性分析
      1周
       

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